ELISA实验指南（22）之ELISA的各个阶段详解（五）

1. 洗板  

      洗板的目的是将结合剂和非结合剂分开。 这涉及到吸出平板孔中的试剂，然后向孔中加入液体。 每孔至少要进行三次这样的处理。 用于冲洗孔板的液体通常是缓冲的，通常是PBS (0.1M, pH7.4)，以保持等渗性，因为大多数抗原和抗体反应在这种条件下是最佳的。 尽管最常用的是PBS，但也可以使用低摩尔浓度的磷酸盐缓冲液(0.01 M)，前提是它们不影响实验的性能，在这种情况下，这些缓冲液的性价比也更高。

      有些实验人员在试验中，用自来水来洗涤，其实是不建议这样做的。因为自来水的成分变化很大(pH值、摩尔浓度等)。 然而，如果水对测试的成分没有显著的影响，也可以进行分析。 一般来说，用溶液冲洗足以清洗未结合试剂的孔板。一些研究人员在每次加洗液(1-5 min)后，将洗液留在孔中一段时间(浸泡时间)，有时洗涤缓冲液中往往加入洗涤剂，特别是Tween-20 ( 0.05 % )。这些都会造成由于空气被滞留而产生的过度起泡导致冲洗条件差的问题，并阻止冲洗液与孔面接触。使用洗涤剂时，一定要注意不对试剂产生不利影响(变性抗原)，还需要更大的注意，防止孔内起泡。下一篇我们来给大家介绍洗涤所用的方法。

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