ELISA实验指南（16）之该如何选择ELISA的检测方法呢（五）

1. 场景B

      接上一篇讲，这个场景和场景A没什么不同，然而有更多的试剂。纯化后的抗原可用来在家兔中制备抗体。因此，鉴于已对场景A所作的保留，建立捕获ELISA法是有基础的，因为兔抗体可以从大量存在的原抗原制备中捕获高浓度的抗原。捕获ELISA法的发展系统如前所述。

      如果有足够的特异性抗原结合到孔板上，抗兔结合物的可用性可能会使竞争性检测的发展成为可能，尽管这不太可能。抗原和兔血清可在间接ELISA中滴定(见上一篇文章 )，使抗原和血清得以优化。这些最佳稀释度可用于建立竞争ELISA方法(之前及其文章有提到 )，其中牛血清可竞争抗原/兔/抗兔偶联体系。再次，必须强调的是，这是不太可能的，因为抗原是粗的，需要某种形式的捕获系统才能允许足够的抗原在孔板上呈现。

      由于场景B具有一些纯化的抗原，因此可用于开发类似的竞争试验。这将取决于此抗原的可获得性，可在初始滴定后测定，其中计算抗原的最佳稀释度。获得纯化抗原的主要好处是在兔体内获得更特异的血清，允许从粗样品中特异性捕获抗原。在许多情况下，有足够纯度的抗原可用于检测。

声明：本文引用自The ELISA Guidebook一书，欢迎转发分享，一起学习进步。