ELISA实验指南（10）之竞争与抑制夹心法ELISAs检测（二）

直接夹心法C-ELISA与I-ELISA的应用

1. 直接夹心C-ELISA检测抗体

      抗体的直接夹心法C-ELISA示意图如图9所示。

Fig. 9.  Direct sandwich competition ELISA for antibody. This system exploits the competition of antibodies in a sample for the binding of a pretitrated quantity of labeled antibody specific for the antigen captured by the coating antibodies on the wells. The extent of competition depends on the relative concentrations of the test and labeled antibodies.

2. 直接夹心I-ELISA用于抗体检测

      抗体的直接夹心酶联免疫吸附实验( I-ELISA )如上一竞争体系所述，除非待测样品在标记抗体加入之前被加入捕获抗原一段时间。在这个孵化步骤之后，有两个选择。首先是将预制的标记抗体直接加入反应混合物中，然后孵育。二是洗孔板，从而在加入标记抗体之前洗掉任何过量的实验抗体。对于每个备选方案，标记抗体有一个孵育步骤，然后洗涤，然后加入底物/发色团溶液。结果是根据不添加测试样本的控件中颜色的减少来读取的。结合的实验抗体浓度越大，标记抗体的抑制程度越大。

      间接夹心ELISA的组分数量增加，试剂组合数量增加。读者现在应该熟悉图解形式的描述，以便能够更简短地审查利用间接夹心ELISA的下一系列实验，并突出所涉及的原则。

3. 直接夹心C和I-ELISA 检测抗原

      直接夹心C-和I-ELISA检测抗原不适用于检测样品中的抗原。