ELISA实验指南（8）之直接I-ELISA与间接I-ELISA法检测

1.  直接I-ELISA抗原检测

      直接I-ELISA用于抗原检测不是一个可用的替代方法，因为试验抗原必须与预先标记的抗体混合，因此，竞争条件适用。一种变化是，试验抗原可以与标记的抗体预混，并在混合后应用于抗原包被板前孵育一段时间。实际上，这与最初在包被板中加入抗原的检测方法没有什么区别。

2. 直接I-ELISA抗体检测

      将孔板上可能含有针对抗原特异性抗体的试验样品加入，孵育一段时间。然后有两种替代品：( 1 )洗板后再加入预先标记抗体，或( 2 )在含有试验样品的孔中加入预先标记抗体。通过这些方法，在与孔板上的抗原结合方面的主动性被赋予测试样品。然后结合抗体，抑制或阻断随后加入的标记抗体的结合。

3. 间接I-ELISA抗原检测

      含抗原的试验样品可与准备好的特异抗体预混，孵育。然后可以将混合物添加到有抗原包被的平板上。然后其与抗体结合的情况用于检测样品的情况。下图说明了这一点。

4. 间接I-ELISA抗体检测

      间接I-ELISA抗体测定原理如下，将含有抗体的样品加入抗原包被板中孵育。然后有两种方法：( 1 )先洗涤，然后加入预先准备的抗体，或者( 2 )不洗涤，向混合液中加入预先准备的抗体。下图说明了这一点。同样，其与抗体结合的情况用于检测样品的情况。