|
ELISA实验指南(7)之竞争法ELISA(二)
间接竞争法ELISA检测 1. 间接C-ELISA抗原检测 间接C-ELISA抗原检测如图7所示
Fig. 7. Indirect C-ELISA antigen measurement. The degree of competition by the binding of antigens in a sample for a pretitrated enzyme-labeled antiserum reaction is determined.
2. 间接C-ELISA抗体检测 间接C-ELISA抗体检测如图8所示。 值得注意的是,同样的预配置体系可以用于抗原和抗体的滴定。适用于抗原和抗体检测的体系的分析灵敏度可随试剂在预滴定阶段的初始滴定而改变。因此,通过使用不同浓度的抗体,可以改变抗原或抗体对竞争或抑制的有效敏感性,从而有利于分析的敏感性或特异性。在设计基于竞争或抑制的检测方法时,很重要的是要认识到这一点,因为它们可以被用来测量抗原或抗体。反应物浓度的改变可以提供更理想的试验,以适应所需的分析参数(所需的特异性和灵敏度的程度)。在设计基于多克隆抗体的检测方法时,这一点尤为重要,因为使用不同稀释度的血清(血清质量的变化取决于针对特定抗原决定簇的抗体的相对浓度)会显著影响多克隆抗体的检测。
Fig. 8. Indirect C-ELISA antibody measurement. The degree of competition by the binding of antibodies in a sample for a pretitrated enzyme-labeled antiserum reaction is determined. |